不同獼猴桃品種潰瘍病抗性鑒定及抗性相關酶研究

mihoutao 2021 年 11 月 15 日23:57:39評論223 views閱讀模式

不同獼猴桃品種潰瘍病抗性鑒定及抗性相關酶研究
易盼盼
【摘要】:當前,獼猴桃已在中國經(jīng)濟果樹中占有一席之地,陜西省是獼猴桃種植面積最大的省份,其獼猴桃產(chǎn)業(yè)發(fā)展在中國獼猴桃產(chǎn)業(yè)發(fā)展中的作用至關重要。近年來,陜西省獼猴桃主栽區(qū)潰瘍病發(fā)生嚴重,對獼猴桃產(chǎn)業(yè)的發(fā)展產(chǎn)生了巨大的影響。 本研究首先分離純化了陜西省秦嶺北麓獼猴桃主栽區(qū)的潰瘍病病原,并對該病原進行分子鑒定及致病力鑒定。其次對18份獼猴桃材料進行田間調查,采用人工接種法將病原菌接種到18份獼猴桃離體枝條及盆栽苗枝條上,觀察統(tǒng)計接種后5、10、15、20d18份材料的感病率,并對三種鑒定方法的結果進行了比較。同時在盆栽毛花、金魁、華優(yōu)、金陽、紅陽獼猴桃接種0、5、10、15、20d后共5個時間段進行采樣,測定不同品種枝條苯丙氨酸解氨酶(PAL)、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、多酚氧化酶(PPO)、過氧化物酶(POD)的活性變化。最后,以陜西省西安市獼猴桃試驗站抗病雄株(SX45872)和感病雌株(西選二號)以及雜交授粉的198株F1代實生苗為對象,利用SSR分子標記技術,并結合集群分類分析法進行了獼猴桃抗?jié)儾』蚍肿訕擞浹芯?,主要研究結果如下: 1.分離純化出陜西秦嶺北麓獼猴桃主栽區(qū)的潰瘍病病原菌,經(jīng)過細菌通用引物和特異性引物擴增以及其16S rDNA序列分析,結果表明:該病原為丁香假單胞菌獼猴桃致病變種(Pseudomonas syringae pv.actindiae),其16S rDNA序列與已報道的獼猴桃病原一致。通過煙草葉片、獼猴桃枝條及葉片接種試驗,結果表明該病原具有侵染煙草和獼猴桃的能力。 2.通過對18份獼猴桃材料的田間調查、離體枝條接種以及盆栽苗活體接種的鑒定,結果表明:18份獼猴桃材料離體枝條以及盆栽苗接種結果與田間調查結果的基本一致,且都達到極顯著相關水平,相關系數(shù)分別為0.968和0.975。因此,認為離體枝條接種和盆栽苗接種可作為獼猴桃潰瘍病的鑒定方法,但與盆栽苗接種相比,離體枝條接種鑒定更簡單、易操作。 3.盆栽苗接種5、10、15、20d后,毛花、華優(yōu)、金魁、金陽和紅陽枝條內PAL、SOD、POD及PPO活性與活性與接種0d時相比,均顯著提高(P0.05),但各品種酶活性峰值出現(xiàn)時間不同;毛花、金魁和華優(yōu)接種后枝條中PAL、SOD、POD及PPO的活性迅速持續(xù)升高,接種10d后達到高峰,而金陽和紅陽酶活性增加較緩慢,接種后15d才出現(xiàn)峰值,并低于毛花、金魁及華優(yōu)的峰值。出現(xiàn)峰值之后,活性不再升高呈緩慢下降趨勢。從接種潰瘍菌后CAT酶活性的變化趨勢來看,毛花、華優(yōu)接種后10d后,出現(xiàn)峰值,金魁接種5d后,其酶活性達到峰值,且這3種獼猴桃材料的峰值均顯著高于接種0d;但金陽和紅陽接種后CAT活性與接種0d時差異不顯著。試驗證明:PAL、CAT、POD、CAT及PPO的活性與獼猴桃品種潰瘍病抗性相關。 4.通過對51對SSR引物的篩選,獲得了與抗?jié)儾』蜻B鎖的分子標記UDK97-428116,并采用人工離體接種將獲得的標記在40個獼猴桃種質資源中進行了驗證,40份材料中僅有一份材料的鑒定結果與分子標記不同,其他39份材料均與分子標記結果一致,表明了該標記的可靠性,從而認為SSR標記UDK97-428116能夠用于獼猴桃材料潰瘍病抗性鑒定和分子標記輔助育種。

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